出品公司: | ATCC |
---|---|
细胞名称: | Sf9细胞, ATCC CRL-1711细胞, sf9细胞, 草地夜蛾卵巢细胞 |
细胞又名: | SF9; sf9; SF-9; Sf-9; sf-9; Sf 9; Spodoptera frugiperda clone 9; Sf clone 9; IPLB-Sf-9AE; IPLB-SF-9AE; IPLB-SF-9; IPLB-Sf-9; IPLB-Sf9 |
存储人: | G Smith, C Cherry, MD Summers |
种属来源: | 草地夜蛾 |
组织来源: | 卵巢 |
疾病特征: | 正常 |
细胞形态: | 上皮细胞样 |
生长特性: | 半贴壁生长 |
培养基: | Sf-900 II SFM/ Sf-900 III SFM/ Grace's Insect Medium |
产品目录号: | CRL-1711 |
生长条件: | 气相:空气, 不需要二氧化碳,温度:28 ℃, |
传代方法: | 1:2至1:6,每周2次。 |
冻存条件: | 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 |
支原体检测: | 阴性 |
**等级: | 1 |
参考文献: |
Vaughn JL, et al. The establishment of two cell lines from the insect Spodoptera frugiperda (Lepidoptera; Noctuidae). In Vitro 13: 213-217, 1977. PubMed: 68913
Zhang PF, et al. Susceptibility of the Sf9 insect cell line to infection with adventitious viruses. Biologicals 22: 205-213, 1994. PubMed: 7811453
Smith GE, et al. Modification and secretion of human interleukin 2 produced in insect cells by a baculovirus expression vector. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82: 8404-8408, 1985. PubMed: 3878519
Hall MR, Gibson W. Cytomegalovirus assemblin: the amino and carboxyl domains of the proteinase form active enzym e when separately cloned and coexpressed in eukaryotic cells. J. Virol. 70: 5395-5404, 1996. PubMed: 8764050
|
细胞图片: |
![]() |
Sf9细胞ATCC CRL-1711草地夜蛾卵巢细胞特点和简介
该细胞对丫纹夜蛾、杆状病毒敏感,可用于杆状病毒的复制。Sf9细胞ATCC CRL-1711草地夜蛾卵巢细胞接受后处理
1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
Sf9细胞ATCC CRL-1711草地夜蛾卵巢细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。**天换液并 检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
Sf9细胞ATCC CRL-1711草地夜蛾卵巢细胞培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 Procell 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。